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구속 스트레스 시 Clusterin이 백서 악하선 조직의 자사에 미치는 작용에 관한 실험적 연구
The Role of Clusterin on Apoptosis of the Submandibular Glands in the Rat under Restraint Stress

대한구강내과학회지 2003년 28권 2호 p.173 ~ 183

이상태, 박순영, 신민자,

소속 상세정보

이상태 (  ) - 경희대학교 치과대학 구강내과학교실
박순영 (  ) - 경희대학교 치과대학 구강내과학교실
신민자 (  ) - 경희대학교 치과대학 구강내과학교실

KMID : 0355220030280020173

Abstract

구강 내에 발생되는 질환의 대부분이 타액의 영향을 받는다는 사실과 타액에 영향을 주는 전신적인 요소 중에서도 스트레스가 중요하다는 것은 이미 잘 알려져 있다. 스트레스가 타액선에 미치는 영향에 관해서는 많은 선학들에 의하여 연구되었고 그 결과에 따르면 구속스트레스 하에서 백서 악하선의 세포가 조직학적으로 자사됨을 알 수 있었으나 초기에 clusterin이 미약하게 발현된 뿐이었다. 이에 본 연구에서는 clusterin이 백서 악하선 조직의 자사에 어떠한 영향을 미치는지를 구명하기 위하여 clusterin의 정확한 발현시기를 관찰함으로써 이의 작용을 유추해보고자 하였다.
7주된 Sprague-Dawley계 웅성백서 12마리를 정상군과 구속스트레스 부여군으로 나누고, 구속스트레스 부여군은 신험 전 기간에 걸쳐 구속장치를 이용하여 구속스트레스를 가한 후 실험 즉일, 3일, 5일에 각각 희생하여 악하선을 절취하고 면역조직화학법을 이용하여 타액선 조직의 변화를 관찰하였다. 그 후 실험군을 달리하여 7주된 웅성백서 32마리를 정상군과 구속스트레스 부여군으로 나누고, 구속스트레스를 가한 후 실험 1, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 30, 36, 42, 48, 54, 60, 66, 72시간에 각각 희생하여 악하선을 절취하고 동결절편을 제작한 후, western blot분석법을 이용하여 악하선에서 clusterin의 변화를 관찰하였다.

1. 구속스트레스에 의하여 핵 붕괴 및 핵 농축 등의 핵 변화를 동반한 세포자사가 유도됨이 조직학적으로 관찰되었다.
2. 구속스트레스 부여 후 9시간까지는 clusterin이 큰 변화 없이 미약하게 관찰되었다.
3. 구속스트레스 부여 후 12시간부터 뚜렷한 clusterin의 발현이 관찰되었고, 24 시간 군까지 균일하게 점차 증가되었다.
4.구속스트레스 부여 후 30시간부터 72시간까지는 clusterin이 불규칙하게 관찰되었다.

본 실험을 통해 백서의 악하선 세포는 구속스트레스에 의해 자사되는 과정에서 clusterin에 의해 초기 보호를 받았던 것으로 생각된다. 또한 실험 후 24시간까지 clusterin이 균일하게 관찰되었던 것은 구속스트레스에 대한 백서 악하선 세포의 일반적인 반응으로 생각되며, 그 후 clusterin이 불규칙하게 발현되었던 것은 백서 개체나 조직 개체의 차이에 따라 나타날 수 있는 변수로 생각된다.
따라서 본 실험을 통해 구속스트레스에 의한 조직의 초기 보호반응과 자사과정에 관여하는 여러 가지 단백질과의 상관관계에 대한 구명이 필요하리라 생각되며, 심한 스트레스에 의해서는 조직이 급성자사 될 수도 있다는 가능성을 제시할 수 있어, 이에 대한 임상적 관리가 중요하리라 생각된다.